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分子克隆中常用的工具酶连接酶、T4 多核苷酸激酶、碱性磷酸酶、核酸酶、琼脂糖酶、蛋白酶、溶菌酶以及一些DNA 结合蛋白。
分子克隆在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。
工具酶：基因工程涉及众多的工具酶可粗略的分为限制酶，连接酶，聚合酶，核酸酶和修饰酶五大类。其中，以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用最为突出。
下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体B
基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶，如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等，在基因工程的操作中有着广泛的用途。1.限制性内切核酸酶限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并在合适的条件下使每一条链一定位点上的磷酸二酯键断开，产生具有3/—OH基团和5/—P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶(endo-deoxyribonuclease)。至今发现的限制性内切核酸酶有I型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶，它们各具特性。基因工程中所说的限制性内切核酸酶都是指Ⅱ型酶。限制性内切核酸酶把目的基因从只有四种碱基A、T、G、C组成的DNA长链(人类DNA长度为3X109个碱基对)中准确地剪切下来。每一种限制性内切核酸酶的识别位点是固定的，如EcoRI的识别位点是GAATTC及其互补序列CTTAAG。………………
基因工程要用到的酶（）①限制酶 ②RNA聚合酶 ③运载体 ④DNA连接酶．A．①③④B．①②④C．③④D．
A、基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，运载体不属于工具酶，A错误；
B、一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列，即具有特异性，B错误；
C、细菌繁殖快、易培养、遗传物质少，常用作受体细胞，C正确；
D、目的基因进入受体细胞需要检测和鉴定，不一定能成功实现表达，D错误．
故选：C．
①限制酶能识别和切割DNA，是基因工程的工具酶之一，①正确；?
②RNA聚合酶参与转录过程，不是基因工程要用到的酶，②错误；?
③运载体不是酶，③错误；?
④DNA连接酶能连接DNA片段，是基因工程的工具酶之一，④正确．
故选：D．
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